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      透析胎牛血清的活处理步骤

      发布时间:2021/7/19 10:56:35      阅读次数:131

         透析型胎牛血清是通过透析去除血清中的一些小分子物质,如葡萄糖 盐类 非蛋白结合分子,透析处理去除分子质量小于10,000Da的分子,过程中无法去除激素,但可能会降低一些类型细胞的生长能力,该血清在4℃下处理,需严格控制PH值,渗透压和葡萄糖浓度.透析胎牛血清降低了低分子量组分浓度,例如能影响其它生物化学生存途径的核苷酸和氨基酸.这个过程具有重复性,并能使次黄嘌呤和胸苷的浓度低于检测限,让透析型胎牛血清更易于受体的研究或掺入.

        透析胎牛血清好坏的判断:
        好的血清应是透明清亮,土黄色或棕黄色,无沉淀或极少沉淀,比较粘稠.如发现血清浑浊,不透明,含许多沉淀物,说明血清污染或血清中的蛋白质变性,若棕红色,说明血清中的血红蛋白含量太高,有溶血现象.
        透析胎牛血清应用:类似在药物研发过程中,采用特定启动子操纵的荧光素酶报告基因,基于细胞平台的高通量药物筛选,也都需要无外源小分子的培养体系.
        透析胎牛血清的活处理步骤:
       、 选用与血清瓶同规格的对照瓶一个
       、 对照瓶内放入与血清等体积的水
       、 温度预试:对照瓶内插入2—3支经挑选的温度计(保证测试温度的准确性),放入水浴箱中,接 通电源,调节温度控制钮,使水浴箱温度所示温度保持在56℃.
       、 血清灭活:血清瓶与带温度计的对照瓶一齐放入水浴箱中,待温度计所示温度上升至56℃时, 定时30分钟.
       、 大瓶血清灭活后,进行分装
       、薇4妫篠ERANA 北美源透析胎牛血清S-FBS-US-065分装后,抽样做无菌试验,-20~-70℃保存.
        透析胎牛血清介绍:
        常规细胞培养需要添加血清来维持细胞的增殖能力,尽管血清可以满足一般细胞培养需求,但在进行营养成分优化和标记特定成分进行研究的实验中,仍需要去除某些特定的成分,常用的去除方法有透析.透析是将血清循环通过中空纤维,并在血清中补充生理盐水以维持渗透压,移除分子量小于10,000Da的小分子,如氨基酸 葡萄糖 盐离子和未结合的蛋白等.因此透析胎牛血清主要用于关注小分子浓度的特殊研究,包括:研究蛋白质组学,同位素标记 细胞信号传导和报告基因分析 报告基因细胞系的筛选等.
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